Корзина пуста

Фармацевтика и Клиническая Диагностика

Производим наборы реагентов Глюкоза ФКД и Холестерин ФКД

+7 (499) 347-7836

e-mail: fkd1997@mail.ru

Москва, ул. Малая Юшуньская, д.1, к.1



Инструкция на Холестерин ФКД

ХОЛЕСТЕРИН-ФКД

 

 

ИНСТРУКЦИЯ

по применению набора реагентов для определения концентрации общего  холестерина колориметрическим энзиматическим методом

 

НАЗНАЧЕНИЕ

Набор предназначен для количественного определения общего холестерина в плазме и сыворотке  крови человека энзиматическим колориметрическим методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике.

Набор рассчитан на проведение  200 определений при расходе 1,0 мл рабочего реагента на 1 анализ и пригоден для различных вариантов микроанализа.

 

ПРИНЦИП МЕТОДА

При гидролизе эфиров холестерина холестеринэстеразой образуется свободный холестерин. Образовавшийся  и свободный  холестерин окисляется кислородом воздуха под действием холестериноксидазы с образованием эквимолярного количество перекиси водорода: последний  под действием пероксидазы  окисляет хромогенные субстраты с образованием   окрашенного соединения. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации холестерина в анализируемом образце и измеряется фотометрически при длине волны 500 (490–540) нм.

 

СОСТАВ НАБОРА

Ферментно-хромогенная  смесь: (…………………….) – 10 таблеток.

Детергент: 10% р-р тритон Х-100, 1 мл  – 1 флакон.

Калибратор: калибровочный раствор холестерина, 5,17 ммоль/л (200 мг/дл), 1 мл – 1 флакон.

 

АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

Набор обеспечивает линейность при определении холестерина в диапазоне концентраций от 2,0 до 25,0 ммоль/л, отклонение от линейности – не более 5%. Чувствительность – не более 0,5 ммоль/л. Коэффициент вариации – не более 5%.

Стабильность окраски не менее 1 часа.

Для проверки правильности определений рекомендуется использовать отечественные или зарубежные контрольные сыворотки, аттестованные данным методом.

Нормальные величины содержания холестерина  в сыворотке и плазме крови человека – 3,5–6,9 ммоль/л,

Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуемого контингента людей.

 

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Ферментно-хромогенная смесь  содержит токсичные компоненты. В случае попадания ее раствора на кожу и(или) слизистые необходимо сразу же промыть пораженное место большим количеством воды. Пипетирование per os категорически запрещается. Другие компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.

При работе с сывороткой или плазмой крови необходимо соблюдать правила техники безопасности принятые в лаборатории, т.к. образцы человеческой крови  следует рассматривать как потенциально инфицированые.

 

 

ОБЕЗВРЕЖИВАНИЕ ОТХОДОВ

Проводить в соответствии с местными правилами.

 

АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Негемолизированная сыворотка крови. Гепаринизированная или ЭДТА плазма.

Сыворотку и плазму крови получают обычным образом. Стабильность образцов

1 день при 20-25 °С

3  дня при 4-8 °С

3 месяца при -20  °С

 

 

ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ

– Спектрофотометр, длина волны 500нм, или фотоэлектроколориметр, (490–540) нм, кювета с длиной оптического пути 10 или 5 мм;

– пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,025–2,0 мл;

– флаконы или пробирки вместимостью 5-10 мл;

– секундомер;

– колбы мерные вместимостью 100 или 200 мл;

– пробирки стеклянные вместимостью 10 мл;

– термостат, поддерживающий температуру +37±1° С;

– вода дистиллированная.

 

ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА

Приготовление рабочего реагента: 10 таблеток ферментно-хромогенной смеси  поместить в мерную колбу вместимостью 200 мл. Добавить 150 мл дистиллированной воды и 0,4 мл раствора детергента.  Тщательно перемешать до полного растворения таблеток, избегая вспенивания раствора. Довести объем дистиллированной водой до метки.  Допускается наличие мелких нерастворенных частиц. В случае их появления, раствору дать отстояться и его аккуратно перелить в чистую емкость.  Перенести рабочий реагент в посуду из темного стекла.

Полученный рабочий реагент можно хранить в темном месте в плотно укупоренной посуде при температуре (+2–8° С)  не более 7 дней.

 

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

Внести в пробирки анализируемые образцы сыворотки или плазмы крови и реагенты по следующей схеме:

 

Отмерить, мл

Опытная проба

Калибровочная

проба

Холостая проба

Сыворотка (плазма) крови

0,01

-

-

Калибровочный  раствор

холестерина

-

0,01

-

Вода дистиллированная

-

-

0,01

Рабочий реагент

2,0

2,0

2,0

 

 

*При работе на фотоколориметре с кюветой с длиной оптического пути 5 мм или 3мм отношение сыворотки к рабочему реагенту должно составляет 1:100.

 

Пробы тщательно перемешать и инкубировать в течение 25 мин при комнатной температуре (+18–25° С) или в течение 15 мин при температуре +37° С.

После окончания инкубации измерить величину оптической плотности опытной и калибровочной проб против контрольной (холостой) пробы в кюветах с длиной оптического пути 10 мм при длине волны 500 (490–540) нм.

Окраска проб стабильна в течение 1 ч. после окончания инкубации при условии предохранения от прямого воздействия солнечных лучей.

 

РАСЧЕТЫ

Расчет концентрации глюкозы в анализируемых пробах провести по формуле:

 

              Eо

  С = ---------  x 5,17 ,

              Eк

 

где:       С  – концентрация холестерина, ммоль/л;

              Eо – оптическая плотность опытной пробы, ед.опт.плотн.;    

Eк – оптическая плотность калибровочной пробы, ед.опт.плотн.;

              5,17 – концентрация холестерина в калибраторе, ммоль/л.

 

 

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

 Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре +2–8° С в течение всего срока годности. Допускается хранение наборов при температуре +25° С не более 5 суток.

Срок годности набора – 12 месяцев.

Рабочий реагент можно хранить при температуре +2–8° С в посуде из темного стекла не более 7 дней при условии достаточной герметизации.

Калибратор после вскрытия флакона плотно укупоренный можно хранить при температуре +2–8° С в темном месте не более 2 месяцев.

 

 

Валюта

Новости